Detection of microorganisms with antibacterial activities from different industrial wastes and GC-MS analysis of crude microbial extract / Detecção de microrganismos com atividades antibacterianas de diferentes resíduos industriais e análise por GC-MS do extrato microbiano bruto

Many soil microorganisms' i.e., bacteria and fungi produce secondary metabolites called antibiotics. These are used for the treatment of some of the bacterial, fungal and protozoal diseases of humans. There is a need for isolation of a broad spectrum of antibiotics from microorganisms due to the emergence of antibiotic resistance. In the present study two antibiotic producing bacteria Klebsiella pneumoniae and Bacillus cereus were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry of Hattar, Haripur Pakistan. Total 10 waste samples were collected from different industries (Marble, Ghee, Soap, Mineral, Steel, Poultry Feed, Pharmaceutical, Qarshi, Cosmetic and Glass). Thirty-three bacterial strains were isolated from industrial wastes of these ten different industries. Fourteen out of thirty-three bacterial strains exhibited antimicrobial activities against at least one of the test microbes considered in this study including Escherchia coli, Staphylococcus aureus and Salmonella typhi. The bacteria were isolated by standard serial dilution spread plate technique. Morphological characterization of the isolates was done by Gram staining. Nine bacterial isolates out of fourteen were initially identified as B. cereus and five as K. pneumoniae through biochemical characterization. The antibacterial activities were tested by well diffusion method. Maximum number of antibiotic producing bacteria were isolated from pharmaceutical and poultry feed industry based on the results of primary screening, the most potential isolates S9, S19, S20, S22 and S23 were selected for secondary screening. The maximum activity against E. coli and S. aureus was recorded by bacterial isolate S19 i.e zones of inhibition of 6.5mm and 9mm while S20 showed 7.5mm and 6mm zones respectively. Molecular identification was carried out on the basis of 16S rRNA sequence [...].

Muitos microrganismos do solo, ou seja, bactérias e fungos produzem metabólitos secundários chamados antibióticos. Eles são usados para tratamento de algumas doenças bacterianas, fúngicas e protozoárias em humanos. Há necessidade de isolamento de um amplo espectro de antibióticos de microrganismos devido ao surgimento de resistência aos antibióticos. No presente estudo, duas bactérias produtoras de antibióticos, Klebsiella pneumoniae e Bacillus cereus, foram isoladas da indústria farmacêutica e de ração avícola de Hattar, Haripur, Paquistão. Um total de 10 amostras de resíduos foi coletado de diferentes indústrias (mármore, ghee, sabão, mineral, aço, ração para aves, farmacêutica, Qarshi, cosmética e vidro). Trinta e três cepas bacterianas foram isoladas de resíduos industriais dessas dez diferentes indústrias. Quatorze das 33 cepas bacterianas exibiram atividades antimicrobianas contra pelo menos um dos micróbios de teste considerados neste estudo, incluindo Escherchia coli, Staphylococcus aureus e Salmonella typhi. As bactérias foram isoladas pela técnica de placa de diluição em série padrão. A caracterização morfológica dos isolados foi feita por coloração de gram. Nove isolados bacterianos de 14 foram inicialmente identificados como B. cereus e cinco como K. pneumoniae por meio de caracterização bioquímica. As atividades antibacterianas foram testadas pelo método de difusão em poço. O número máximo de bactérias produtoras de antibióticos foi isolado da indústria farmacêutica e de ração avícola com base nos resultados da triagem primária, os isolados mais potenciais S9, S19, S20, S22 e S23 foram selecionados para a triagem secundária. A atividade máxima contra E. coli e S. aureus foi registrada pelo isolado bacteriano S19, ou seja, zonas de inibição de 6,5 mm e 9 mm, enquanto S20 mostrou zonas de 7,5 mm e 6 mm, respectivamente. A identificação molecular foi realizada com base na análise da sequência 16S [...].

Bacillus cereus bacteremia in a patient with an abdominal stab wound / Bacteriemia por Bacillus cereus en paciente con herida de arma blanca abdominal

Abstract Bacillus cereus is a gram positive microorganism commonly involved in gastrointestinal infection but capable of causing severe infections and bacteremia. We describe here a case of bacteremia caused by B. cereus in a previously healthy young woman admitted to the intensive care unit following emergency surgery due to a penetrating abdominal stab wound and subsequent hepatic lesion. She developed fever during admission and cultures were taken. B. cereus was isolated in blood and hepatic fluid collection cultures. Treatment was adjusted according to the isolate, with good clinical results. It is important to highlight the pathogenic potential of this microorganism and not underestimate it as a contaminant when it is isolated from blood samples.

Resumen Bacillus cereus es un microorganismo gram positivo comúnmente involucrado en infecciones gastrointestinales, pero capaz de causar infecciones graves y bacteriemia. Presentamos un caso de bacteriemia por B. cereus en una mujer joven previamente sana que ingresa en la unidad de cuidados intensivos luego de una cirugía de emergencia, debido a una herida abdominal por arma blanca con lesión hepática. La paciente desarrolla fiebre durante la internación, por lo que se toman cultivos. Se aísla B. cereus en hemocultivos y material de colección hepática. Se ajusta el tratamiento según los hallazgos, con buena evolución clínica. Esta comunicación ilustra una fuente poco común de bacteriemia por B. cereus. Asimismo, destaca el potencial patogénico de este microorganismo, cuyo hallazgo en muestras de sangre no siempre debe conducir a su rápida desjerarquización como contaminante.

Bacillus cereus e Geobacillus stearothermophilus em leite ultra alta temperatura (UAT) / Bacillus cereus and Geobacillus steartothermophilusin ultra high temperature (UHT) milk

O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença de B. cereus e G. stearothermophilus em 100 amostras de leite UAT (integral e desnatado). O isolamento dos esporos e das células vegetativas seguiu metodologias oficiais, com pequenas modificações. B. cereus foi isolada de 7% amostras de leite UHT, de 6 diferentes marcas. As contagens máximas de células vegetativas e esporos de B. cer eus foram de 3,54 Log UFC/mL e 3,93 Log esporos/mL, respectivamente. A presença dos genes codificadores de enterotoxina não hemolítica (NHE) foi observada em 33% dos isolados e da hemolisina (HBL ) em 100% dos isolados. O gene hblA foi encontrado em 91,6 % dos isolados, porém nenhum isolado apresentou os 3 genes do complexo HBL. G. stearothermophilus foi identificada em 22,8% (34/149) dos isolados de esporo altamente resistente ao calor (HRRS), representando 18% das amostras de leite UAT e as contagens de esporos variaram de < 1Log a 3,40 Log esporos/mL.

Caracterização microbiológica de maniva cozida durante as etapas de processamento / Microbiological characterization of cooked maniva during the processing stages

Analisou-se 12 amostras de maniva cozida provenientes de duas indústrias localizadas no Pará. As amostras encontraram-se de acordo a legislação para os parâmetros microbiológicos de Salmonella spp., Contagem de Estafilococos Coagulase Positiva e Contagem de Bacillus Cereus com ausência em 25 g, <102 UFC/g e <102 UFC/g, respectivamente. Para Coliformes Termotolerantes apenas uma das indústrias obteve um produto de acordo com o previsto de <3,0 NMP/g. Houve um aumento significativo na etapa de resfriamento para contagem de bolores e leveduras, bactérias aeróbias mesófilas e coliformes termotolerantes tornando-se necessário análises mais detalhadas nessa etapa que apresentou crescimento de microorganismos que podem comprometer o produto final.

Contaminação microbiológica em goma de mandioca para tapioca / Microbiological contamination of tapioca flour

O consumo da tapioca, produto tradicional no norte e nordeste brasileiro, tem-se expandido amplamente no mercado, devido à demanda de alimentos sem glúten por parte da população. No processamento da goma de mandioca para tapioca não são aplicadas temperaturas elevadas para eliminação de microrganismos, podendo apresentar risco ao consumidor. Com o intuito de avaliar a contaminação microbiológica da goma de mandioca, realizou-se a análise de 20 amostras de goma de mandioca, obtidas em dois mercados de venda do produto artesanal e duas marcas industrializadas, sendo uma com conservantes e a outra sem, comercializadas no mercado de Feira de Santana e região. Com base na RDC 12/2001 da ANVISA (BRASIL, 2001), observou-se que amostras artesanais apresentaram contaminação por Bacillus cereus em níveis maiores que o estabelecido pela legislação. A amostra da indústria A não apresentou contaminação por bolores e leveduras por conter o conservante sorbato de potássio em sua composição. Verificou-se que 70% das amostras artesanais e 11% das amostras industrializadas apresentaram presença de Salmonella sp., indicando risco ao consumidor. As amostras de goma de mandioca industrializadas apresentaram valor de pH mais ácido que as artesanais (p<0,05), sendo que esses valores não enquadram-se dentro dos limites estabelecidos para o padrão de identidade e qualidade do produto. Foi observado um elevado teor de atividade de água em todas as amostras, não diferindo entre si (p<0,05). Portanto, verificou-se que as gomas artesanais A e B não atenderam os requisitos de padrão microbiológico e as amostras industrializadas A e B não apresentaram o padrão de identidade requerido para féculas de mandioca, estando todos os produtos em não conformidade com a legislação brasileira.

Pesquisa de microrganismos patogênicos em produtos cárneos de estabelecimentos certificados pelo Serviço de Inspeção Municipal de Rio Verde – GO / Research of pathogenic microrganisms in meat products from certified establishments by the Rio Verde Municipal Inspection Service - GO

A incidência e a quantidade dos microrganismos patogênicos, presentes na carne, varia de acordo com as condições de manejo durante a criação e com os cuidados higiênicos nas operações de abate dos animais e posterior manipulação das carcaças. Neste sentido, este trabalho promoveu uma análise microbiológica de microrganismos patogênicos presentes em quibe cru e cortes de frango temperado produzidos no município de Rio Verde, Goiás. No diagnóstico, foram encontradas prevalências de Salmonella spp., Bacillus cereus e Listeria spp, comprovando as falhas presentes na manipulação. Concluindo que há falhas e necessidades de adequações técnicas, como adequação na legislação vigente à realidade dos municípios.

Veiculação de bactérias de importância alimentar em especiarias comercializadas em feira livre

O objetivo desse trabalho foi analisar a qualidade microbiológica das especiariascanela, orégano e pimenta do reino comercializadas na feira livre de Cruz das Almas no Recôncavo da Bahia, por meio da quantificação de coliformes a 45°C, Staphylococcus spp., Staphylococcus coagulase positiva, Bacillus spp., Escherichia coli, Bacillus cereus e Salmonella spp. A pimenta do reino diferiu estatísticamente (p>0,05) apresentando maior contagem quando comparado com a canela e o orégano. A prevalência de S. coagulase positiva foi de 60%, 57% e 47% para pimenta do reino moída, orégano e canela, respectivamente. E. coli e Salmonella estiveram presentes na pimenta do reino em 94% e 20%, respectivamente. A contagem de coliformes a 45ºC na pimenta foi maior (3,4 log NMP. g-1) em relação a canela (0,5 log NMP.g-1) e orégano (ausência). A pimenta do reino moída apresentou alta carga microbiana com patógenos de importância alimentar como Salmonella spp., Staphylococcus coagulase positiva e B. cereus.

Avaliação da capacidade de formação de biofilmes de Bacillus cereus isolados de produtos lácteos frente a diferentes temperaturas / Evaluation of the capacity to form biofilm by Bacillus cereus isolated from dairy products at different temperatures

Bacillus cereus encontra-se entre os patógenos de maior preocupação na indústria de alimentos por sua capacidade em formar biofilmes. Como resultado, podem contaminar os alimentos que entram em contato com as superfícies, representando dessa forma um obstáculo para conservação de leite e produtos lácteos, o que coloca em risco a saúde dos consumidores. Objetivou-se avaliar a capacidade de formação de biofilmes de estirpes de B. cereus frente à diferentes temperaturas encontradas na indústria de laticínios em superfície de aço inoxidável. A capacidade de formação de biofilme foi avaliada em diferentes temperaturas (5, 15, 25 e 32 ºC) e intervalos de tempo (24, 48,72, 96 e 120h). As estirpes de B. cereus apresentaram diferenças significativas nas temperaturas avaliadas e na capacidade de adesão, onde uma das estirpes apresentou maior capacidade de se aderir. Constatou-se que altas temperaturas favoreceram o desenvolvimento do biofilme e baixas temperaturas retardaram esse processo.

Aislamiento de Bacillus cereus en restaurantes escolares de Colombia / Isolation of Bacillus cereus in school restaurants in Colombia

Resumen Introducción. Bacillus cereus es reconocido como un agente patógeno causante de intoxicaciones alimentarias. Se trata de una bacteria de metabolismo aerobio facultativo capaz de formar esporas, lo que le permite sobrevivir a la pasteurización y el calentamiento e, incluso, a la irradiación con los rayos gamma usados para reducir los agentes patógenos de los alimentos. Objetivo. Estudiar la presencia de B. cereus y su toxina diarreica en el arroz y en alimentos a base de cereales, harinas o féculas listos para el consumo en restaurantes escolares de algunos departamentos de Colombia. Materiales y métodos. Se hizo un estudio descriptivo y transversal con alimentos listos para el consumo distribuidos en restaurantes escolares de los departamentos que más notifican enfermedades transmitidas por alimentos al sistema de vigilancia, así como en los de menor notificación. Resultados. Se recolectaron 479 muestras en ocho departamentos, 74 municipios y 363 restaurantes escolares; el 63 % correspondió a muestras de arroz y el 37 % a alimentos como coladas. El 9 % de las muestras analizadas fueron positivas para B. cereus y, en el 91 % de estas, se detectó la toxina diarreica. Conclusiones. En todos los departamentos estudiados se encontró B. cereus. El manejo de materias primas y el inadecuado tratamiento térmico de los alimentos fueron los factores directamente relacionados con las enfermedades transmitidas por alimentos. Es importante reforzar la vigilancia e incentivar la investigación y la notificación de los brotes de enfermedades transmitidas por alimentos para mejorar la calidad de la información, llevar a cabo acciones de comunicación, prevención y coordinación intersectorial, y con los manipuladores, con el fin de adoptar las medidas necesarias que garanticen la inocuidad de los alimentos, así como la eliminación de los factores de riesgo de estas enfermedades.

Abstract Introduction: Bacillus cereus is recognized as a pathogen that causes food poisoning. It is a facultative aerobic metabolism bacterium capable of forming spores, which allows it to survive pasteurization and heating even by the gamma irradiation used to reduce pathogens in food. Objective: To study the presence of Bacillus cereus and its diarrheal toxin in rice and ready-to-eat cereals, flours, and starches in school restaurants in Colombia. Materials and methods: We conducted a descriptive cross-sectional study of ready-to-eat foods distributed in school restaurants in the departments with the most and the least notification of foodborne diseases to the surveillance system. Results: A total of 479 samples were collected from eight departments, 74 municipalities, and 363 school restaurants, 63% of which were rice samples and 37%, starchy food samples; 9% of them tested positive for Bacillus cereus. In 91% of the samples that tested positive, the bacterium was isolated with the presence of the diarrheal toxin. Conclusions: In all the departments with B. cereus in the samples, the factors directly related to food-borne diseases were the handling of raw materials and the poor thermal treatment of food. Strengthening surveillance by stimulating research and reporting on outbreaks of foodborne diseases is important to improve the quality of information, to develop communication, prevention and intersectional coordination and manipulation measures, as well as to take the necessary actions to guarantee the safety of food and to eliminate the risk factors that may contribute to this problem.

Bacillus cereus as the main casual agent of foodborne outbreaks in Southern Brazil: data from 11 years / Bacillus cereus como principal agente etiológico em surtos de intoxicação alimentar no Sul do Brasil: dados de 11 anos / Bacillus cereus como el principal agente causante de brotes de enfermedades alimentarias en el Sur de Brasil: datos de 11 años

Foodborne diseases are a global concern. In Brazil, the most prevalent pathogen found in foodborne outbreaks is Salmonella sp. (14.4%), followed by Staphylococcus aureus (7.7%), Escherichia coli (6.5%), and Bacillus cereus (3.1%). With the aim to perform a regional detailed analysis of foodborne intoxication, we analyzed 253 outbreaks' profile reports to Food Surveillance team of the General Secretariat of Health Surveillance of Porto Alegre, Rio Grande do Sul State, between 2003 and 2013. In contrast to what was most notified in Brazil, in Porto Alegre the main outbreak agent identified was Bacillus cereus (32.2%) and, based on the patient symptoms, most cases were linked to enterotoxin production. The majority of the outbreaks were linked to the ingestion of food containing cereals or sauces poorly kept at environment temperature during the stock or preparation. We believe that, due to the compulsory use of pasteurized eggs in our city, Salmonella sp. outbreaks are less important here.

As doenças de veiculação alimentar representam um problema de ordem global. No Brasil, o patógeno mais prevalente em surtos de intoxicação alimentar é a Salmonella sp. (14,4%), seguido pelo Staphylococcus aureus (7,7%), Escherichia coli (6,5%) e Bacillus cereus (3,1%). Com o objetivo de realizar uma análise regional detalhada da intoxicação alimentar, examinamos os relatórios de 253 surtos, notificados à equipe de Vigilância de Alimentos da Coordenadoria Geral de Vigilância em Saúde de Porto Alegre, Rio Grande do Sul, entre 2003 e 2013. Ao contrário do que é notificado no Brasil, em Porto Alegre, identificamos como principal agente etiológico, o Bacillus cereus (32,2%) e de acordo com os sintomas dos pacientes, a maioria dos casos esteve associada à produção de enterotoxina. A maioria dos surtos foram associados à ingestão de alimentos que continham cereais ou molhos mantidos à temperatura ambiente durante o armazenamento ou preparação. O uso compulsório de ovos pasteurizados em Porto Alegre pode explicar a relativa escassez de surtos de Salmonella sp. no município.

Las enfermedades transmitidas a través de la comida son una preocupación de carácter global. En Brasil, el patógeno encontrado de forma más prevalente en los brotes de epidemias alimentarias es la Salmonella sp. (14,4%), seguida por el Staphylococcus aureus (7,7%), Escherichia coli (6,5%), y el Bacillus cereus (3,1%). Con el fin de realizar un análisis regional detallado de los brotes de infecciones alimentarias, analizamos el perfil de 253 brotes, registrados por el servicio de Vigilancia Alimentaria de la Secretaría General de Vigilancia en Salud de Porto Alegre, Rio Grande do Sul, entre 2003 y 2013. En contraste con lo que fue más notificado en Brasil, en Porto Alegre el principal agente causante de brotes fue identificado como el Bacillus cereus (32.2%) y, basado en los síntomas del paciente, la mayoría de los casos estaban relacionados con la producción de la enterotoxina. Muchos de los brotes estaban relacionados con la ingesta de comida que contenía cereales o salsas mal conservadas a temperatura ambiente durante el almacenaje o la preparación. Creemos que, debido a la utilización obligatoria de huevos pasteurizados en nuestra ciudad, los brotes de Salmonella sp. son menos relevantes aquí.

Atividade antibacteriana de óleos essenciais de café verde e torrado (Coffea arabica), Cacau (Theobroma cacao), casca e folha de canela do ceilão (Cinnamomum zeylanicun) / Antibacterial activity of essential oils from green and roasted coffee (Coffea arabica), Cacau (Theobroma cacao), bark and cinnamon leaf from Ceylon (Cinnamomum zeylanicun)

Diversos conservantes naturais têm sido utilizados na inativação de micro-organismos, sem efeitos adversos com relação aos valores nutricionais dos alimentos e da saúde humana. Entretanto, estudos apontam reações adversas aos aditivos sintéticos, tais como reações tóxicas e o possível desenvolvimento de cânceres específicos. A busca por agentes antimicrobianos naturais em alternativa aos conservantes sintéticos tem sido constante; a fim de proporcionar o controle microbiológico e a extensão da vida de prateleira, excluindo, portanto, as desvantagens trazidas pelo uso de aditivos artificiais, através de ação antimicrobiana de óleos essenciais. O objetivo do trabalho foi verificar a ação antibacteriana dos óleos essenciais de café verde e torrado (Coffea arabica), cacau (Theobroma cacao), casca e folha de canela-do- -Ceilão (Cinnamomum zeylanicun) sobre as bactérias Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella Enteritidis e Salmonella Typhimurium. Os óleos essenciais foram impregnados em discos de papel filtro de 6 mm de diâmetro, próprios para antibiograma; sendo posteriormente colocados em placas de Petri contendo Ágar Nutriente previamente semeado com os micro-organismos. As mesmas foram incubadas a 35°C por 24 e 48 horas. Após este período foi possível observar e medir o diâmetro dos halos e, halos iguais ou superiores a 10 mm foram considerados significativos de atividade antimicrobiana. Os óleos essenciais de cacau, canela casca e canela folha inibiram significativamente todos os micro-organismos testados. E. coli foi inibida significativamente por todos os óleos essenciais. O óleo essencial de canela casca demonstrou os melhores efeitos inibitórios, sendo o mais significativo sobre a E. coli (halo de 36 mm).(AU)

Caracterização da intoxicação alimentar causada pelo Bacillus cereus: uma revisão / Characterization of food poisoning caused by Bacillus cereus: a review

Neste trabalho foi realizada uma revisão com o objetivo de demonstrar a importância do Bacillus cereus, o perfil toxigênico desse grupo de bactérias formadoras de esporos, que tem sido coligada a surtos de intoxicação alimentar, as metodologias utilizadas para sua determinação, identificar os fatores de virulência das toxinas emética e diarréica, bem como formas para evitar a intoxicação e os tratamentos para prevenção. A presença de B. cereus tem sido detectada em equipamentos e utensílios, mostrando que são fontes potenciais de transmissão do micro-organismo para os alimentos e também a importância da higienização correta dos equipamentos.

Surto de doença trasmitida por alimentos nos municipios de Mauá e Ribeirão Pires - SP / Outbreak of foodborne diseases in the municipalities of Maua and Ribeirao Pires - SP

Doenças de transmissão hídrica e alimentar (DTHA) acarretam importantes problemas econômicos e de saúde pública no mundo atual. Este estudo relata um surto de Doença Transmitida por Alimento - DTA que envolveu 12 pessoas de duas residências localizadas na Região do ABC paulista em dezembro de 2012. Quatro pessoas de uma residência tiveram sintomas de diarreia, cólica abdominal, náusea, vômito, febre e prostração, sendo que apenas duas consumiram o bolo preparado em Ribeirão Pires, SP - Brasil. Outras oito pessoas consumiram o mesmo alimento no município de Mauá e, além dos sintomas citados, houve também registro de insuficiência renal e parada cardiorrespiratória. Dentre os envolvidos, uma menina de oito anos veio a óbito após convulsão e bronco-aspiração. O período variou entre 2 e 22 horas após o consumo do alimento. A amostra de bolo foi analisada segundo a metodologia preconizada pelo BAM-FDA e teve como resultados: Coliformes termotolerantes (NMP = 4,6x104/g); Bacillus cereus (1,5x105 U.F.C./g) e presença de Salmonella Enteritidis em 25 gramas. Clostridium perfringens, Staphylococcus aureus e Listeria monocytogenes não foram isolados. Foram realizadas duas coproculturas que apresentaram resultados positivos para Salmonella Enteritidis. As cepas de Salmonella spp isoladas, tanto no alimento como nas fezes dos pacientes, apresentaram similaridade genética e mesmo perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos. Assim, foi constatado o envolvimento do bolo como veiculador de patógenos e ressaltada a importância do trabalho em conjunto das vigilâncias sanitárias e epidemiológicas de ambos os municípios e o laboratório de referência em saúde pública, fundamental na elucidação deste surto.

Bacillus cereus strain isolated from Demodex folliculorum in patients with topical steroid-induced rosaceiform facial dermatitis

Abstract: The aim of the study was to identify Bacillus species from the Demodex folliculorum of patients with topical steroidinduced facial rosaceiform dermatitis. Of the 75 patients examined, 20% had clinical spinulosis, while 18.66% had dermoscopic features of Demodex: follicular plugs and tails. Of the 17.33% positive patients identified upon microscopy for Demodex, samples for bacterial culture were plated on trypticase soy Colombia agar. Identification was performed by microorganisms grown method mass spectrometry. We identified a strain of Bacillus cereus.

Presencia de los genes de toxigenicidad nheA, nheBy nheC en cepas de Bacillus cereus aisladas de leches deshidratadas en Costa Rica / Detection of toxigenic genes nheA, nheB and nheC in Bacillus cereus strains isolated from powdered milk samples in Costa Rica

La leche en polvo es un producto de alto consumo humano que no precisa de ser conservado en frío, no obstante, diversos microorganismos pueden deteriorarlo. En la población costarricense, también se observa este alto consumo, por la facilidad del alimento para transporte, preparación y su costo competitivo. Bacillus cereus es una bacteria potencialmente patógena asociada a este tipo de producto, capaz de desarrollar toxinas dependiendo de la presencia o ausencia de los respectivos genes codificantes. En este estudio se determinó la presencia de los genes toxigénicos nheA, nheB y nheC en cepas de B. cereus aisladas de leche deshidratada vendida en el mercado nacional costarricense.Se examinaron cinco lotes diferentes, de diez marcas comerciales de leche en polvo distribuidos en el área metropolitana de San José Costa Rica. Se procedió a cuantificar B. cereus en las muestras de leche en polvo mediante la técnica de Número Más Probable (NMP) e identificar los aislamientos utilizando el equipo automatizado Vitek®. Adicionalmente, se determinó la presencia de los genes nheA, nheB y nheC mediante la técnica de PCR. La frecuencia de aislamiento de Bacillus cereus en las muestras de leche en polvo analizadas alcanzó un 50%, con cantidades que oscilaron entre 3 y >100 NMP/g. Se recuperaron 19 cepas de B. cereus aisladas, cinco fueron positivas para los tres genes toxigénicos, lo cual revela la presencia de B. cereus potencialmente toxigénico en leches deshidratadas del mercado nacional, lo que representa un riesgo para la salud pública.

Powdered milk is a frequently consumed product that does not need to be kept under cold conditions. Nevertheless, different microorganisms may contaminate it. Powdered milk is a highly consumed product by Costa Rican population, and Bacillus cereus is a potentially pathogenic bacteria associated to it, with the ability to develop toxins depending on the presence of the respective codifying genes. The aim of this study was to determine the presence of the toxigenic genes nheA, nheB and nheC from B. cereus strains, found in powdered milk sold at the Costa Rican national market. Five different lots of ten brands of powdered milk, distributed in the metropolitan area of San José, Costa Rica were analyzed. B cereus load was quantified using the Most Probable Number technique and identified using the Vitek® system. The presence of the toxigenic genes was determined using the PCR technique. The isolation frequency of this bacteria in the powdered milk samples analyzed reached 50%, with populations ranging from 3 to >100 MPN/g. Five out from nineteen strains were found positive for the three toxigenic genes, indicating contamination with potentially toxigenic B. cereus in powdered milk distributed in the national market, and an important risk for public health.

Gene detection and toxin production evaluation of hemolysin BL of Bacillus cereus isolated from milk and dairy products marketed in Brazil

Bacillus cereusis an ubiquitous, spore-forming bacteria that can survive pasteurization and the majority of the heating processes used in the dairy industry. Besides, it is a pathogen responsible for different types of food poisoning. One type of foodborne disease caused by B.cereusis the diarrheal syndrome, which is caused by the ingestion of vegetative cells producing toxins in the small intestine. One virulence factor for the diarrheal syndrome is the toxin hemolysin BL (HBL), a three-component protein formed by the L1, L2 and B components. In order to evaluate the presence of diarrheal strains isolated from milk and dairy products, 63 B. cereus isolates were obtained from 260 samples of UHT milk, pasteurized milk and powdered milk, sold in commercial establishments and from different brands. The isolates were subjected to the Polymerase Chain Reaction (PCR) for the detection of the encoding genes for the L1, L2 and B components and the toxin production capacity were evaluated with an immunoassay. A total of 23 [36.5%] isolates were identified carrying simultaneously the three tested genes, from which, 20 [86.9%] showed toxigenic capacity. 26 [41.3%] isolates did not carry any of genes tested and the other 14 [22.2%] were positive for one or two of them. The results showed a high toxigenic capacity among the B. cereus isolates able to produce the HBL, indicating a potential risk for consumers.

Calidad bacteriológica y detección de Bacillus cereus toxigénicos en arroz blanco cocido expendido en el área metropolitana de la provincia de San José, Costa Rica

El gran consumo de arroz a nivel mundial es uno de los factores que favorece su implicación en brotes de origen alimentario y de uno de los patógenos más importantes ligado a este producto como el Bacillus cereus El objetivo del presente trabajo fue evaluar la calidad microbiológica de 50 muestras de arroz blanco cocido expendido en restaurantes de área Metropolitana de San José Costa Rica, incluyendo la determinación del recuento total aerobio mesófilo, Número Más Probable de coliformes totales, fecales y E. coli, B. cereus así como de detección de sus genes nheA, nheB, y nheC. Para el análisis bacteriológico se siguieron los procedimientos descritos en el Compendio de Métodos para el Examen Microbiológico de Alimentos y para la detección de los genes se utililzó un PCR múltiplex y la metodología descrita por Hansen et al., 2001. De las muestras analizadas 46% fueron positivas por coliformes totales, 34% por coliformes fecales, 16% por E. coli, 10% por B. cereus y un 8% por B. cereus toxigénico Lo anterior sugiere que el consumo de arroz blanco en restaurantes puede representar un riesgo para la salud pública y que es necesario implementar mejoras con el fin de brindarle al consumidor un producto inocuo y de mejor calidad.

Bacteriological quality and toxigenic Bacillus cereus detection in cooked white rice sold at the Metropolitan Area of San José, Costa Rica.. The wide use of rice is one of the factors that favors its implication in food borne diseases, and one of the most important pathogens associated to it is Bacillus cereus. The aim of this work was to evaluate the microbiological quality of 50 samples of white cooked rice sold in restaurants at the Metropolitan Area of San José, Costa Rica, including the determination of the total aerobic plate count, the Most Probable Number of total and fecal coliforms and Escherichia coli. MPN of Bacillus cereus and the detection of nheA, nheB and nHeC genes, associated to its toxicity, was also performed. Procedures described in the Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods were followed for the bacteriological analysis, multiplex PCR was used for the detection of genes following the methodology described by Hansen et al, 2001. 46% of the samples analysed were positive for total coliforms, 34% for fecal coliforms, 16% for E. coli and 10% for B. cereus, being 8% toxigenic. These facts suggest that white cooked rice may represent a risk for Pubic Health and that improvements shall be performed in order to offer a safe and high quality product to consumers.

Contaminação por Bacillus cereus em superfícies de equipamentos e utensílios em unidade de alimentação e nutrição / Contamination by Bacillus cereus on equipment and utensil surfaces in a food and nutrition service unit

A constatação de que Bacillus cereus é um microrganismo que constitui problema especial em plantas de processamento de alimentos, dentre as quais se incluem restaurantes universitários, levou a realização deste trabalho, que teve como objetivo contribuir para a avaliação de riscos a que se expõem os usuários de cozinhas de grande porte, por meio da identificação de pontos do ambiente, a partir dos quais o microrganismo pode ser transferido aos alimentos. A presença de B. cereus foi detectada em 38,3 por cento das amostras de equipamentos e utensílios estudados. As contagens atingiram até 5,7x10² UFC/cm², sendo que os valores mais elevados foram obtidos a partir de amostras dos setores de distribuição, indicando a importância destes locais como fontes potenciais de transmissão do microrganismo para os alimentos.

The confirmation that Bacillus cereus is a microorganism that represents a special problem in food processing plants, such as university cafeterias, inspired this work, the scope of which was to evaluate the risks consumers are exposed to by identifying the contamination points from whence the microorganism can be transferred on to food. The presence of B. cereus was detected in 38.3 percent of the equipment and utensils studied. Counts of up to 5.7x10 ² CFU/cm² were found, with the highest values being found in samples from distribution sectors, indicating the importance of these areas as potential sources of microorganism transmission on to food.

Phenotypic & genetic characterization of Bacillus cereus isolated from the acute diarrhoeal patients.

Background & objectives: Bacillus cereus is one of the pathogens responsible for human diarrhoea, mainly due to consumption of contaminated food. The present study was undertaken to determine the occurrence of B. cereus among diarrhoeal patients and its phenotypic and genetic characteristics that determine the virulence and clonal features. Methods: Stool specimens were collected for two years from acute diarrhoeal patients attending the two referral hospitals in Kolkata. Presence of virulence genes in B. cereus was determined by PCR. Clonality was assessed by pulsed-field gel analysis (PFGE) by restriction digestion with SmaI and NotI enzymes. Enterotoxins were detected by haemolysin assay and using BCET-RPLA kit. Invasion assay was done on Hep-2 cell line. Antimicrobial susceptibility was tested by disc diffusion method. Results: B. cereus was identified in 54 (3.5%) of the 1536 diarrhoeal cases studied. Majority of the isolates were susceptible to many antibiotics but showed resistant to amoxyclav and cephalosporins. Six genes covering the two different enterotoxic complexes determining the pathogenicity of B. cereus have been characterized by PCR. The nhe genes were detected in a higher proportion than hbl. Except in two, clonal diversity was noticed among 21 B. cereus isolates. Haemolytic enterotoxin was detected in 76 per cent of the isolates. Majority of the isolates (67%) produced in vitro enterotoxin (BCET) confirming its involvement in the infection. Interpretation & conclusions: Though the presence of B. cereus was not high in patients with diarrhoea, several virulence factors confirm their association with diarrhoea. Distinct clonality was identified in majority of the isolates indicating their origin from different sources.